Часть IV. Физиология систем внутренних органов

Принцип метода: для определения групп крови используется явление агглютинации исследуемой крови со стандартными сыворотками. При встрече одноименных агглютиногенов и агглютининов (А+a; В+b) происходит агглютинация эритроцитов.

Для определения групп крови используются сыворотки I, II, III групп двух серий. Реакцию проводят при комнатной температуре. Соотношение сыворотки и эритроцитов — 10:1. Разными палочками размешивают каплю крови с сывороткой до равномерного розового цвета. Если происходит реакция агглютинации, капля становится прозрачной, а эритроциты склеиваются в виде комочков. Группа крови устанавливается по наличию или отсутствию агглютинации. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы двух серий должны совпадать. Трактовка результатов (табл. 21.4):

• агглютинация не наступила ни в одной капле сывороток — группа крови 0 (I);
• агглютинация произошла с сыворотками I и III групп — группа крови A (II);
• агглютинация наступила с сыворотками I и II групп — группа крови В (III);
• агглютинация наступила с сыворотками I, II и III групп; для исключения неспецифической агглютинации необходимо провести реакцию с сывороткой IV группы; если агглютинация не наступит, исследуемая кровь AB (IV) группы.

В настоящее время рекомендована методика определения групп крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-В, которая имеет более высокую специфичность и выраженность реакции агглютинации, поэтому можно пользоваться одной серией реагентов.

В углубления планшеты двумя пипетками наносят по капле цоликлонов анти-А и аити-В, рядом с каплями антител наносят по маленькой капле крови (в 10 раз меньше капли цоликлонов) и капли смешивают. Результат реакции оценивают в течение 2,5 мин. Трактовка результатов (см. табл. 21.4):

• агглютинации нет ни с цоликлоном анти-А, ни с цоликлоном анти-В — группа крови 0 (I);
• агглютинация только с цоликлоном анти-А — группа крови А (II);
• агглютинация только с цоликлоном анти-В — группа крови В (III);
• агглютинация имеется как с цоликлоном анти-А, так и с цоликлоном анти-В — группа крови AB (IV); в этом случае для исключения спонтанной агглютинации необходимо провести контрольное исследование крови путем добавления капли изотонического раствора натрия хлорида, в котором агглютинация должна отсутствовать.

Таблица 21.4. Реакции агглютинации эритроцитов при определении групп крови

В крови конкретного человека агглютинины к эритроцитарным агглютиногенам системы AB0 одновременно не присутствуют (см. табл. 21.3), но при переливании крови от донора с одной группой к реципиенту с другой группой может возникнуть ситуация, когда в крови реципиента одновременно будут находиться и агглютиногены, и агглютинины именно к этим агглютиногенам, то есть возникнет ситуация несовместимости. Кроме того, такая несовместимость может возникнуть и по другим системам групп крови. Именно поэтому стало правилом, что переливать можно только одногруппную кровь.

Для того чтобы свести к минимуму ошибки, связанные с неправильным подбором сыворотки, ложной оценкой результата либо — в редких случаях — несовместимостью по другим групповым признакам, перед переливанием крови производят перекрестную биологическую пробу. Для этого эритроциты донора смешивают на стекле со свежей сывороткой реципиента при температуре 37 °С. Это так называемая прямая проба: цель ее сводится к определению в сыворотке реципиента антител к эритроцитам донора. Переливание крови возможно лишь при безусловно отрицательном результате прямой пробы, то есть при отсутствии агглютинации или гемолиза. При обратной пробе эритроциты реципиента помещают в сыворотку донора при температуре 37 °С для выявления в крови донора антител к эритроцитам реципиента.

Вопрос об «универсальных донорах». Ранее люди с группой крови 0 считались «универсальными донорами», и их кровь переливали лицам любых других групп. В настоящее время подобные гемотрансфузии считаются недопустимыми. Антигены А и В в эритроцитах группы 0 отсутствуют или находятся в пренебрежимо малых количествах, поэтому практически любой объем этих эритроцитов можно без опасений переливать реципиентам других групп крови. Однако в плазме группы 0 содержатся агглютинины анти-А и анти-В, и эту плазму можно вводить лишь в ограниченном объеме. При переливаниях больших количеств агглютинины донора уже не разводятся плазмой реципиента, и наступает агглютинация.