Для выявления активации базофилов методом проточной цитометрии различные производители представляют коммерческие наборы - Flow-CAST (Bühlmann Laboratories AG), BASOTEST (Glicotope Biotechnology), BD FastImmune (Beckton Dickinson), Allergenicity kit (Beckman Coulter) и др., которые различаются по специфическим маркерам как для выявления базофилов, так и для оценки их активации (табл.3).
Все указанные в таблице реактивы имеют статус in vitro diagnostic, регистрационные удостоверения Минздрава России и разрешены к использованию на территории нашей страны. В настоящее время завершается апробация отечественного набора (АлкорБио) для определения активации базофилов, его основные характеристики (маркеры для идентификации и оценки активации клеток, а также использование антител к IgE-FcεRI в качестве позитивного контроля) схожи с таковыми у Allergenicity кit.
Таблица 3. Реагенты для оценки активации базофилов методом проточной цитометрии
| FLOW-CAST | BASOTEST | Allergenicity kit | BD FastImmune |
Идентификация базофилов | SSlow CCR3+ | SSlow Анти-IgE+ | SSlow CD3-CD294+ CD203c+ | SSlow CD123+ HLA DR- |
Позитивный контроль | - Антитела к FcεRI
- fMLP
| fMLP | Антитела к IgE-FcεRI | fMLP |
Маркеры активации базофилов | CD63+ (допопция CD203c+++) | CD63+ | CD203c+++ | CD63+ |
Типы клеток, на которых представлены маркеры активации | - базофилы, тучные клетки, тромбоциты, макрофаги (стандарт)
- базофилы (с допопцией)
| базофилы, тучные клетки, тромбоциты, макрофаги | базофилы | базофилы, тучные клетки, тромбоциты, макрофаги |
Антикоагулянт | ЭДТА | гепарин | ЭДТА или гепарин | гепарин |
В случае успешного завершения апробации отечественного набора и регистрации его в Министерстве здравоохранения в стране появятся реагенты, преимуществом которых будет не только экономическая доступность, но и возможность применения аллергенов данного производителя для использования в тесте активации базофилов. Сейчас широкий спектр аллергенов, в том числе рекомбинантные молекулы, используется в тест-системах АлкорБио для определения специфических IgE антител, но результаты исследований свидетельствуют о возможности их более широкого применения.