8. Цитогенетическая дозиметрия

Цитогенетическая дозиметрия является одним из признанных методов оценки дозы облучения, особая значимость которого обусловлена тем, что этот метод дозиметрии может быть использован в случаях отсутствия или невозможности выполнения физической дозиметрии, в случаях, когда необходимо выполнить ретроспективную оценку дозы облучения; актуальна цитогенетическая дозиметрия и при оценке хронического воздействия радиации.

Биологическая цитогенетическая дозиметрия, основана на количественном учете специфических индуцированных радиацией нарушениях генетического аппарата клеток – дицентрических, кольцевых, транслоцированных хромосом, а также и некоторых других хромосомных нарушений. Количество индуцированных нарушений зависит от дозы облучения и типа ионизирующих излучений, что позволяет при наличии калибровочных кривых (зависимость доза облучения – частота цитогенетических нарушений) определить полученную дозу облучения (рис. 8.1).

Рис. 8.1. Типичные кривые зависимости «доза облучения – частота дицентрических хромосом» при различных типах ионизирующих излучений [1].

В середине 1960-х годов был разработан первый метод биологической дозиметрии – анализ дицентрических хромосом, который в настоящее время рассматривается как «золотой стандарт» биодозиметрии. С 1978 года началось активное внедрение биологической дозиметрии в практическую деятельность и за прошедшее с тех пор время этот метод был настолько усовершенствован, что анализ дицентриков стал обычной составляющей программ радиационной защиты многих государств – членов МАГАТЭ [2]. В результате многолетних исследований в области радиационной защиты панель методов цитогенетической дозиметрии была значительно расширена и к настоящему времени опубликованы 3 издания руководств по биологической дозиметрии [2, 3, 4], в которых представлены современные диагностические подходы цитогенетической дозиметрии. В нашей стране для практического использования была разработана медицинская технология «Биологическая индикация радиационного воздействия на организм человека с использованием цитогенетических методов». Медицинская технология утверждена федеральным органом исполнительной власти, осуществляющим функции по контролю и надзору в сфере здравоохранения – Федеральной службой по надзору в сфере здравоохранения и социального развития от 16 февраля 2007 г. № ФС-2007/015у («Перечень медицинских технологий, разрешенных к применению в медицинской практике»). Основанием к разработке и практическому использованию рекомендаций явились многочисленные материалы многолетних отечественных и зарубежных исследований, рекомендации ВОЗ, МАГАТЭ. Настоящие рекомендации разработаны с учетом генетических особенностей российской популяции. Также для практического использования разработаны Методические рекомендации МР-03.019 69 2014 «Использование классического метода окраски хромосом для ретроспективной оценки дозы».

К практическому использованию в настоящее время рекомендованы несколько цитогенетических методов оценки дозы облучения: анализ нестабильных хромосомных аберраций, анализ стабильных хромосомных аберраций, анализ преждевременно конденсированных хромосом, микроядерный тест с блоком цитокинеза. Каждый из методов имеет свои преимущества и недостатки, поэтому современные биодозиметрические лаборатории на практике используют панель цитогенетических методов для эффективной оценки дозы облучения в различных ситуациях и сценариях облучения: острый период после облучения или отдаленный, хроническое воздействие ионизирующих излучений, общее облучение или частичное, высокие или низкие дозы. Характеристика методов цитогенетической дозиметрии представлена в табл. 8.1.

Получение материала для цитогенетической дозиметрии, хранение, доставка:

Материалом для выполнения цитогенетической дозиметрии является образец периферической крови. Пробу крови из вены, не менее 10 мл, можно брать в течение нескольких часов после радиационного облучения всего тела. Однако, в случае частичного облучения тела или неравномерного облучения рекомендуется провести взятие крови по крайней мере на следующий день для того, чтобы получить равномерную, в результате естественной миграции лимфоцитов, смесь облученных и необлученных клеток. Если лечение включает переливание цельной крови или фракций крови, важно получить пробу крови пациента до начала лечения. В случае аварийных ситуаций необходимо принять меры к тому, чтобы обеспечить оперативное получение пробы крови, так как по истечении приблизительно четырех недель, выходы аберраций начинают падать, что повышает неопределенность любых оценок дозы облучения.

В качестве антикоагулянта для забора крови используется натрий-гепарин. Забор крови рекомендуется проводить с помощью стерильных вакуумных пробирок для забора крови. Если используется высушенный гепарин, необходимо должным образом перемешать кровь, переворачивая пробирку несколько раз.

Хранить пробирки необходимо в охлажденном состоянии (<20°C); при этом условии их можно доставить в лабораторию без значительного снижения жизнеспособности. Во время транспортировки следует поддерживать пробы крови идеально в диапазоне от 18°C до 24°C. Для поддержания необходимой температуры можно использовать охлаждающие или термостатические пакеты.

В любом случае следует избегать замораживания проб.

Два или три дня перевозки являются приемлемым сроком. При авиаперевозках кровь не должна проходить через рентгеновские аппараты систем безопасности.

Таблица 8.1. Характеристика различных методов цитогенетической дозиметрии