Определение глюкозы в крови
Референтным методом для определения глюкозы в плазме (сыворотке) крови является ферментный гексокиназный метод. Реакция регистрируется при 340 нм по образованию никотинамидадениндинуклеотида (тест Варбурга). Этот метод высокоспецифичен и не дает реакций с другими компонентами крови. Широкому использованию этого метода препятствует цена исследования.
В клинико-диагностической лаборатории в основном используют глюкозооксидазный метод. Он основан на окислении глюкозы кислородом в присутствии фермента глюкозооксидазы: образуется перекись водорода, которая в присутствии пероксидазы окисляет хромоген. При этом скорость изменения оптической плотности раствора пропорциональна количеству глюкозы в биопробе. Определение глюкозы глюкозооксидазным методом можно проводить в биологических жидкостях. Антикоагулянты гепарин, этилендиаминтетраацетат, оксалат натрия, цитрат, стабилизаторы фторид и монойодацетат практически не влияют на результаты.
Однако перекись водорода, образующаяся в этой реакции, может окислять не только хромоген, но и другие вещества, присутствующие в биологической жидкости: аскорбиновую кислоту, мочевую кислоту, билирубин. При этом доля Н2О2, окисляющая хромоген, снижается, что может привести к занижению результата по глюкозе, поэтому этот метод не рекомендуется для исследования глюкозы в моче.