Поиск
Озвучить текст Озвучить книгу
Изменить режим чтения
Изменить размер шрифта
Оглавление
Для озвучивания и цитирования книги перейдите в режим постраничного просмотра.

Глава 2. Лабораторная диагностика микозов

Правила сбора и доставки материала для микологического исследования

От правильности взятия материала во многом зависит эффективность лабораторного анализа. При отрицательном результате исследований всегда следует рассматривать вопрос о повторном взятии материала.

Основные причины ложноотрицательных результатов:

  • недостаточно материала;
  • неправильное взятие;
  • использование накануне забора противогрибковых препаратов, мазей;
  • неправильная доставка материала в лабораторию, высушенный материал.

Ликвор собирают с соблюдением всех правил асептики. Оптимальным объемом для микологического исследования считают 3–5 мл ликвора. Образцы должны быть доставлены в лабораторию как можно быстрее и обработаны в кратчайшие сроки. При невозможности немедленной доставки ликвор хранят при комнатной температуре или инкубируют при 35 °С.

Кровь собирают из локтевой вены в количестве 5–10 мл в жидкую среду Сабуро (1:5) или промышленно изготовленные среды для микологического исследования культур крови.

Мокроту собирают в стерильную банку натощак, утром, после пробуждения, предварительно почистив зубы, прополоскав рот. Доставка в лабораторию необходима в течение 2 ч. При невозможности быстрой доставки образцы хранят в холодильнике при температуре 4 °С не более 24 ч.

Мочу, среднюю утреннюю порцию, собирают в стерильную посуду после тщательного туалета наружных половых органов. Материал доставляют в лабораторию в течение 2 ч. При невозможности быстрой доставки хранят при комнатной температуре в течение 1–2 ч или в холодильнике не более 1 сут.

Отделяемое слизистых оболочек (мазки из зева, носа, конъюнктивы, влагалища и др.), ран, свищей собирают стерильным ватным тампоном.

Биопсийный материал помещают в стерильную посуду.

Пунктаты абсцессов собирают в стерильные пробирки.

Соскобы с кожи, ногтей. Материал отбирают с помощью скальпеля, пинцета в местах инфицирования, особенно на границах здоровой и пораженной кожи. При взятии соскобов кожа пациентов должна быть чистой, без присутствия мазей. У пациентов с подозрением на онихомикоз образцы собирают с помощью ножниц, тупого скальпеля, соскребая пораженную часть всех слоев ногтя. Для удобства образцы кожи и ногтей можно собирать над черной бумагой, на которой отчетливо видно количество собранного материала и которую после запечатывания доставляют в лабораторию. При отсутствии черной бумаги материал может быть собран в чашки Петри.

Волосы и шерсть вместе с чешуйками извлекают пинцетом.

Посев материала

Ликвор центрифугируют в течение 5 мин со скоростью 1500 оборотов/мин, осадок используют для микроскопии и посева. Для микроскопии окрашивают тушью, по Граму, альциановым синимпо Моури. Посев осуществляют на три чашки [агар Сабуро или Сабуро-декстрозный агар (СДА)], остатки переносят в жидкую среду Сабуро. Инкубируют две чашки при температуре 37 °С и одну чашку и жидкое Сабуро — при 28 °С. Посевы просматривают ежедневно. Длительность инкубации — не менее 10 дней.

Кровь. Нативную кровь засевают на агар Сабуро, СДА, в жидкую среду Сабуро (1:5) или промышленно изготовленные флаконы для исследования грибов в культурах крови. Инкубируют при температуре 28 и 37 °С. Посевы просматривают ежедневно. Длительность инкубации — не менее 10 дней.

Мокроту, бронхоальвеолярный лаваж засевают на агар Сабуро, СДА с хлорамфениколом (Левомицетином) и гентамицином. Инкубируют посевы при температуре 28 и 37 °С. Перед посевом микроскопируют нативные и окрашенные препараты.

Мочу центрифугируют в течение 15 мин со скоростью 1500 оборотов/мин, сливают надосадочную жидкость. Осадок микроскопируют в калия гидроксиде (KOH), по Граму, PAS, и засевают 0,1 мл осадка на агар Сабуро с гентамицином, хлорамфениколом, СДА. Инкубируют посевы при температуре 28 и 37 °С.

Отделяемое слизистых оболочек, наружного слухового прохода, ран засевают тампоном на агар Сабуро с гентамицином, хлорамфениколом (Левомицетином), вращая всей поверхностью тампона по поверхности питательной среды. Инкубируют посевы при температуре 28 и 37 °С.

Кожные и ногтевые чешуйки переносят в скошенный сусло-агар, СДА, тщательно прижимая их к агару в 2–3 точках. Инкубируют посевы при температуре 28 и 37 °С. Предварительно микроскопируют на наличие Malassezia и элементов других грибов. При предварительном диагнозе «отрубевидный лишай» посевы производят на среду Диксона. При подозрении на дерматофиты возможно использование агара Сабуро с циклогексимидом, подавляющим рост многих плесневых грибов, Candida spp., Cryptococcus spp.

Кусочки тканей и органов (биопсия, аутопсия) отпечатывают на поверхность агара Сабуро, СДА в разные точки. Одновременно кусочки тканей помещают в жидкую среду Сабуро. Инкубируют посевы при температуре 28 и 37 °С.

Одной из ошибок, приводящей к ложноотрицательным результатам при микологических исследованиях, считают недостаточную длительность инкубации. Длительность инкубирования в зависимости от исследуемого материала и предполагаемого возбудителя представлена в табл. 2.1.

Для продолжения работы требуется Регистрация
На предыдущую страницу

Предыдущая страница

Следующая страница

На следующую страницу
Глава 2. Лабораторная диагностика микозов
На предыдущую главу Предыдущая глава
оглавление
Следующая глава На следующую главу

Оглавление

Данный блок поддерживает скрол*