Цитологическое исследование опухоли при НХЛ является важным компонентом диагностики. Цитологическое исследование, выполняемое по мазкам-отпечаткам и пунктатам опухоли, в большинстве случаев позволяет высказать предположение о НХЛ и определить предварительный вариант (лимфобластные или крупноклеточные).
Большой вклад в изучение опухолевых клеток при НХЛ у детей внесли отечественные цитологи [1, 2]. При лимфобластных лимфомах из клеток-предшественниц опухолевый субстрат представлен лимфобластами типа L1 и L2 [по Франко-Американо-Британской (FAB) классификации] (табл. 2). Для лимфобластов типа L1 характерны цитологические формы микрогенераций, в которых определяется округлое ядро с нежно-сетчатой структурой хроматина, цитоплазма выражена слабо. Ядерно-цитоплазматическое соотношение высокое. В отличие от лимфобластов типа L1 лимфобласты типа L2 более крупные, форма ядра может быть неправильной, ядерно-цитоплазматическое соотношение среднее [3].
Лимфобласты типа L3 определяются при лимфоме Беркитта и характеризуются средними размерами, округлым/овальным ядром, с нежно-сетчатым хроматином, часто визуализируется одна или несколько нуклеол. Цитоплазма базофильная, вакуолизированная, ядерно-цитоплазматическое соотношение высокое [3].
Таблица 2. Цитологическое разделение лимфобластов на L1, L2 и L3 (по Франко-Американо-Британской классификации, 1976)
| Признак | L1 | L2 | L3 |
| Размеры клеток | Мелкие | Гетерогенные | Средние |
| Ядерно-цитоплазмати-ческое соотношение | Высокое | Среднее | Умеренное/ высокое |
| Форма ядра | Округлая | Неправильная, округлая, с расщеплением | Округлая, овальная |
| Хроматин | Гомогенный, нежно-сетчатый | От нежно-сетчатого до грубого, комковатого | Плотный, диффузный |
| Нуклеолы | Отсутствуют или единичные | Одна или несколько мелких | Одна или несколько |
| Количество цитоплазмы | Небольшое | От небольшого до умеренного | Умеренное |
| Вакуолизация цитоплазмы | Отсутствует | Различная | Выражена |
| Базофилия цитоплазмы | Не выражена | Выражена редко | Выражена часто |
Клеточный состав при ДВКЛ крайне полиморфный. В цитологических препаратах присутствуют крупные опухолевые клетки с морфологией центробластов, имеют округлые/овальные или многодольчатые ядра, мелкодисперстный хроматин, ядрышки небольшие, составляют 2–4 у края ядерной мембраны. Базофильная цитоплазма выражена умеренно. Возможны варианты с преобладанием клеток с морфологией иммунобластов, в ядре которых расположена одна крупная, центральная нуклеола. В случаях анапластического варианта ДВКЛ цитологическая картина неотличима от таковой при анапластической крупноклеточной лимфоме (АКЛ), причем только гистологическое и иммуногистохимическое исследования позволяют установить правильную нозологическую форму лимфомы. Опухолевые клетки анапластического варианта ДВКЛ крупные, могут быть полигональные. Ядро плеоморфное. Часть клеток могут быть двухъядерными или многоядерными с крупными ядрышками и напоминать клетки Рид–Березовского–Штернберга [4, 5].
Для ПМВКЛ характерно присутствие лимфоидных опухолевых клеток среднего и крупного размера, цитоплазма которых бледная, в ряде случаев вакуолизированная [6]. Ядра могут быть округлыми, овальными или многодольчатыми [7, 8].
При анапластической крупноклеточной лимфоме цитологический состав опухоли представлен крупными клетками с широкой базофильной цитоплазмой. Ядра овальные/полигональные, ядерная мембрана может иметь инвагинаты, в большинстве ядер визуализируются нуклеолы [5].
Гистологическое исследование позволяет определить тип роста опухоли (очаговый, диффузный или нодулярный), наличие или отсутствие прорастания капсулы лимфатического узла, наличие ангиоматоза и клеточный состав опухолевого субстрата. Гистологическая картина НХЛ весьма полиморфна и определяет вариант НХЛ. Так, при ЛБ происходит замещение нормальной структуры ткани диффузным пролифератом из мономорфной популяции гиперхромных лимфоидных клеток с бластной морфологией среднего размера с округло-овальными ядрами, несколькими небольшими ядрышками (до 5), перинуклеарным «гало»; отмечается высокая митотическая активность, выражены морфологические признаки апоптоза. Макрофаги, фагоцитирующие апоптотические тельца, создают картину «звездного неба». Данный признак не является строго специфичным для ЛБ, а отражает высокую пролиферативную активность и апоптоз клеток опухоли, обусловленные при ЛБ реаранжировкой MYC. Характеристики, представленные выше, описывают «классический» морфологический вариант ЛБ. При атипичном варианте ЛБ (у взрослых больных встречается намного чаще, чем у детей) присутствуют клетки с плазмоцитарной дифференцировкой, клеточные элементы с явлениями ядерного полиморфизма. По мере накопления иммунофенотипических и молекулярно-генетических данных об атипичном варианте ЛБ последний был в большинстве случев реклассифицирован в качестве самостоятельной нозологической формы — В-клеточной лимфомы высокой степени злокачественности (HGBL), с беркиттоподобной морфологией, включая DH-/TH-лимфомы (double- and triple hit lymphomas) и HGBL, NOS без дополнительного уточнения (БДУ) [2, 9].
Первое описание гистологической структуры ЛБ принадлежит G. O’Conor (1961), который охарактеризовал увиденные изменения в препарате как лимфобластную пролиферацию клеток в окружении большого числа гистиоцитов [10]. В 1964 г. была установлена связь ЛБ и вируса, относящегося к семейству γ-герпесвирусов рода лимфокриптовирусов [11, 12]. В образцах опухоли, привезенных Денисом Беркиттом из Уганды, при электронной микроскопии Энтони Эпштейн и Ивонна Барр обнаружили вирусные частицы, позже получившие название вируса Эпштейна–Барр (ВЭБ) [13]. Данное открытие положило начало активному изучению роли вирусов в патогенезе лимфом.