Микроскопическая техника
В современной гистологии имеется большое количество методов исследования. Однако основные среди них — световая и электронная микроскопия. На лабораторных занятиях для распознавания клеток, тканей органов на оптическом и ультраструктурном уровне (на электронограммах) необходимо овладение некоторыми важными навыками микроскопии. Основные части, принцип работы оптического микроскопа изучаются на кафедрах физики, биологии.
Правила работы с обычным световым микроскопом.
- Установите микроскоп на малом увеличении до щелчка револьверного устройства.
- С помощью вогнутого зеркала установите от искусственного источника света необходимое для микроскопии равномерное освещение поля зрения.
- Опустите конденсор на 1,0–1,5 см от отверстия в предметном столике и положите на него над центром отверстия препарат покровным стеклом кверху. Нельзя располагать препарат вниз предметным стеклом.
- Добейтесь с помощью вращения макровинта (кремальеры) четкого изображения и изучите препарат на малом увеличении. Вращать микровинт на малом увеличении нельзя!
- Для последующего изучения какой-либо структуры на большом увеличении поставьте ее в центр поля зрения и проверьте четкость изображения движением макровинта.
- Переведите револьверное устройство на большое увеличение до щелчка (под контролем зрения). После этого микровинтом отрегулируйте фокус большого увеличения.
- При работе на большом увеличении для изучения оптической глубины объекта (структуры располагаются на разных уровнях) следует постоянно вращать микровинт вперед и назад, не заходя за пределы ограничителя.
- Для большей контрастности изображения используйте конденсор.
- По окончании микроскопии переведите микроскоп на малое увеличение и уберите препарат. Нельзя вынимать препарат из-под объектива большого увеличения.
Разрешающая способность и увеличение микроскопа определяют качество изображения.
Общее увеличение микроскопа — это произведение увеличения объектива на увеличение окуляра. Разрешающая способность микроскопа — это наименьшее расстояние, при котором две точки видны как раздельные. Разрешающая способность зависит от длины световой волны. Разрешающая способность микроскопа увеличивается при использовании источника света с меньшей длиной волны. В стандартном световом микроскопе, использующем видимую часть спектра света (длина волны 0,4 мкм), она равна ≈0,2 мкм. В электронном микроскопе используется поток электронов с более короткой длиной волны. Разрешающая способность ультрафиолетового микроскопа составляет 0,1 мкм, а электронного — 0,1–0,7 нм. Увеличить разрешающую способность также можно, применяя иммерсионный объектив с использованием капли иммерсионного масла между объективом и предметом.