Глава 8. Клинические результаты предоперационного введения препаратов гиалуроновой кислоты для улучшения заживления операционной раны. И.К. Жукова, Е.С. Степанкина, А.О. Ованесова

Для изучения изменения в коже после папульного введения препа­рата Meso-Wharton P199 мы провели клинико-лабораторное иссле­дование.

Больная К. (история болезни № 35294047) обратилась по поводу абдоминоптоза для проведения абдоминопластики. После информированного согласия пациентке за 1,5 мес до операции было проведено клиническое исследование (рис. 8.1, 8.2).

В кожу заведомо удаляемого кожно-жирового лоскута вводили:

• физиологический раствор (контрольная группа исследований);
• препарат Meso-Wharton P199 (в правую часть лоскута);
• раствор ГК (в левую часть лоскута).

Препараты вводили по следующей схеме.

1. Вводили ряд папул препарата Meso-Wharton P199, ГК и физиологического раствора.
2. Через 1 нед в 1-й ряд вводили повторно препарат Meso-Wharton P199 справа и ГК — слева. Формировали 2-й ряд первичного введения препаратов.
3. Через 1 нед в 1-й ряд вводили препараты в 3-й раз, во 2-й ряд — во 2-й раз и формировали 3-й ряд введения препаратов.
4. Через 1 нед в 1-й ряд вводили препараты в 4-й раз, во 2-й ряд — в 3-й раз, в 3-й ряд — во 2-й раз и формировали 4-й ряд препаратов.
5. В качестве контроля планировали взять на исследование участок кожи в норме; участок кожи, в который проведен только вкол иглы для исследования эффекта травмы; участок кожи, в который введен физиологический раствор.

Через 1 мес после начала эксперимента провели абдомино­пластику, иссекли избыточный кожно-жировой лоскут и взяли по 12 препаратов из каждой зоны введения для гистологического и гистохимического исследования. Послеоперационный период протекал без особенностей. Рана зажила первичным натяжением. В отдаленном периоде пациентка результатами операции была довольна. Проведенное клиническое исследование не ока­зало
никакого отрицательного воздействия на течение после­операционного периода.

В препарате после однократного введения ГК через 1 нед отме­ча­лись очаговое умеренное увеличение матрикса, коллагеновые, эластические волокна и единичные фибробласты нормального строения (рис. 8.3).

Через 2 нед после однократного введения ГК отмечались: очаговая умеренно выраженная гипертрофия коллагеновых волокон сетчатого слоя, очаговое увеличение матрикса, умерен­ное число фибробластов нормального строения веретеновидной формы (рис. 8.4).

Через 2 нед после двукратного (с промежутком в 2 нед) введения ГК отмечались очаговая гипертрофия коллагеновых волокон глубоких слоев сетчатого слоя слабой степени выраженности, диффузное увеличение матрикса в объеме, препарат с макси­маль­ным увеличением площади матрикса по отношению к площади коллагеновых и эластических волокон, умеренное число фибро­бластов нормального строения веретеновидной формы.

Таким образом, введение ГК влияет в основном на увеличение площади матрикса и никак не влияет на коллагеновые и эластиновые волокна.

Через 1 нед после однократного введения препарата Meso-Wharton P199 (рис. 8.5) в сетчатом слое была отмечена выраженная гипертрофия коллагеновых волокон с их более плотным расположением в объеме дермы, а также препарат с максимальным объемом волокон по отношению к матриксу.

Через 2 нед после однократного введения препарата Meso-Wharton P199 отмечалась очаговая умеренно выраженная гипертрофия коллагеновых волокон сетчатого слоя.

Через 2 нед после двукратного (с промежутком в 2 нед) введе­ния препарата Meso-Wharton P199 (рис. 8.6) отмечалось более плот­ное расположение коллагеновых и эластических волокон по всему объему, часть волокон была с выраженной и умеренно выраженной степенью гипертрофии.

Таким образом, с помощью этапного гистологического иссле­до­вания 12 препаратов нам удалось установить, что макси­мальная площадь волокон по отношению к матриксу наблю­далась в образцах после введения пептидов, что определялось увеличением толщины и плотности коллагеновых волокон (рис. 8.7). Показано, что после введения ГК наблюдается макси­мальная площадь матрикса по отношению к площади коллаге­новых и эластических волокон.

Рис. 8.7. Гистологическая картина участка кожи через две недели после двукратного введения препарата гиалуроновой кислоты (слева) и препарата Meso-Wharton P199 (справа)

По результатам ИГХ-исследования 12 препаратов из каждой зоны введения наиболее показательными маркерами явились проколлаген и транскрипционный фактор АР-1.

В исследуемой группе максимальное значение оптической плот­ности экспрессии проколлагена (показатель, характе­ри­зую­щий интенсивность ИГХ-реакции в препарате, который поз­во­ляет судить о количестве исследуемого вещества в нем) наблюдалось после двукратного введения препарата Meso-Wharton P199 и составляло 0,285 у.е., также оно было высоким в дру­гих препаратах — 0,260, 0,273 и 0,278 у.е. соответственно (рис. 8.8–8.11). Минимальные значение оптической плот­ности были в образцах № 1 (норма) и после введения ГК — 0,175 и 0,194 у.е. соответственно, то есть после введения препарата Meso-Wharton P199 количество коллагена в коже увеличилось на 61,4–68%. По-видимому, в этом заключается эффективность использования препарата для улучшения заживления кожной раны при формировании нормотрофического рубца (р ≤0,5).

При исследовании маркера пролиферации клеток показано, что наиболее интенсивное деление фибробластов кожи наблюдалось после введения препарата Meso-Wharton P199, тогда как делящиеся клетки практически отсутствовали после инъекций ГК.

Таким образом, гистологическая и ИГХ-картина свидетельст­вует, что инъекционное введение препарата Meso-Wharton P199 оказывает позитивное воздействие на кожу по сравнению с контрольными образцами.

1. Пролифераторная активность клеточного пула возрастает.
2. Увеличивается содержание волокнистых структур дермы (по сравнению с контролем и ГК).
3. Отмечен динамический рост содержания белка проколлагена, что свидетельствует о процессе коллагеногенеза.
4. Прослеживается положительная тенденция в динамике лабораторных показателей в зависимости от кратности введения и сроков экспозиции Meso-Wharton P199 в тканях.
5. Единственным положительным результатом использования ГК является увеличение площади межклеточного матрикса.