12.1. МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ПРОТОЗОЙНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Простейших выявляют в различных биологических материалах, взятых от больного.
Фекалии исследуют в день дефекации (обычно доставляют в лабораторию утром), причем вегетативные подвижные формы дизентерийной амебы выявляют не позднее 20 мин после дефекации, а вегетативные формы других простейших (лямблий, диэнтамеб) исследуют в течение первых 1-1,5 ч после дефекации.
Кровь доставляют в лабораторию в стерильных пробирках (для серологических исследований) или в виде мазков и препарата «толстая капля» для исследования на малярию.
Микроскопический метод - основной метод диагностики протозойных инфекций. Микроскопируют мазки, окрашенные по Романовскому-Гимзе или Райту. Иногда применяют серологический, аллергологический, биологический и молекулярно-генетический (ПЦР и др.) методы диагностики.
Исследование фекалий. Фекалии исследуют в день дефекации. Из фекалий, внесенных в небольшом количестве (с булавочную головку) в каплю физиологического раствора, готовят мазок в виде негустой эмульсии на предметном стекле и смешивают с каплей 1% раствора Люголя. На приготовленную смесь наносят покровное стекло и микроскопируют с окуляром × 10 и объективом × 40 для выявления амеб и жгутиковых (лямблий и диэнтамеб). Дополнительно изучают трофозоиты дизентерийной амебы при окраске буферным раствором метиленового синего. Ооцисты криптоспоридий выявляют модифицированными методами окраски по Цилю-Нильсену. Они окрашиваются в красный цвет (кислотоустойчивые).
Исследование крови. Для исследования крови готовят тонкий мазок и толстую каплю, которые окрашивают по Романовскому-Гимзе или Райту. Для приготовления тонкого мазка на край предметного стекла наносят небольшую каплю крови, к которой касаются краем шлифованного стекла, наклоненного под углом 45° к предметному стеклу. Растекшуюся каплю по шлифованному краю быстро и равномерно передвигают к противоположному краю стекла. Мазок должен быть равномерным и тонким по всей поверхности стекла. Дату исследования, фамилию и инициалы или номер истории болезни наносят простым карандашом на высохшем мазке (надпись не смывается после окрашивания).