4. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ТРОМБОЦИТОВ

Исследовать состояние тромбоцитарной функции можно с помощью следующих методов:

• подсчета количества тромбоцитов;

• определения формулы тромбоцитов;

• измерения объема тромбоцитов;

• определения времени кровотечения;

• исследования агрегации тромбоцитов;

• исследования адгезии тромбоцитов;

• определения активности ФВ;

• оценки ретракции кровяного сгустка;

• теста тромбодинамики;

• оценки МКЦП по мазкам костного мозга.

ПОДСЧЕТ КОЛИЧЕСТВА ТРОМБОЦИТОВ

Существует несколько способов подсчета количества тромбоцитов: в счетных камерах, мазках и с помощью автоматического анализатора [46].

УНИФИЦИРОВАННЫЙ МЕТОД ПОДСЧЕТА ТРОМБОЦИТОВ В СЧЕТНОЙ КАМЕРЕ

Для подсчета количества тромбоцитов лучше всего использовать венозную кровь. В качестве АКГ лучше применять этилендиаминте-трауксусную кислоту (ЭДТА). При взятии крови из пальца возникает высокая вероятность агрегации тромбоцитов.

Исследуемую кровь разводят в 200 раз. Для этого в сухую пробирку набирают 4 мл реактива (Кокаина гидрохлорид^♠ 3 г, натрия хлорид 0,25 г, фурацилин 0,25 г, дистиллированная вода 100 мл или 1% раствор аммония оксалата, прокипяченный и профильтрованный; наиболее активно лизирует эритроциты раствор аммония оксалата) и 0,02 мл крови. Перемешивают и оставляют на 25-30 мин для гемолиза эритроцитов. Помещают в камеру Горяева, расположенную во влажной среде, выдерживают 5 мин для оседания тромбоцитов. Используют объектив с 40-кратным увеличением с фазово-контрастным устройством, производят подсчет клеток в 25 больших квадратах.

Расчет числа тромбоцитов в 1 мкл проводят по формуле:

где Х - число тромбоцитов в 1 мкл; а - число тромбоцитов, сосчитанных в 25 больших квадратах; 200 - разведение крови; 250 - множитель, приводящий результат к объему 1 мкл; 25 - число больших квадратов.