1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет многократно увеличить количество копий определенного фрагмента ДНК благодаря следующим друг за другом автоматизированным циклам репликации. При этом в каждом цикле ПЦР число молекул ДНК удваивается. Сколько молекул ДНК будет получено после 20 циклов репликации?
2. Для получения копий молекулы ДНК при проведении ПЦР используются два синтетических ДНК-праймера, которые комплементарны концевым (фланкирующим) участкам исследуемого участка ДНК (ДНК-мишени). Концевые (фланкирующие) участки ДНК-мишени имеют следующую последовательность нуклеотидов:
5? ААГЦЦГТТАЦЦГААГ 3?;
5? ТАТЦЦГГГГЦТАЦЦТ 3?.
◊ Запишите последовательности ДНК-праймеров, состоящих из восьми нуклеотидов.
◊ Стрелками укажите направление синтеза новых цепей ДНК.
3. Для проведения ПЦР были использованы два праймера, состоящих из шести нуклеотидов: 3? ТАТАЦГ 5? и 5? ЦЦГТГЦ 3?. Изучаемая молекула ДНК имеет следующую структуру:
5? ГГЦТААЦЦГТГЦААТГЦАТТТГЦАТГЦАТАТАТГЦААТГЦЦ 3?; 3? ЦЦГАТТГГЦАЦГТТАЦГТАААЦГТАЦГТАТАТАЦГТТАЦГГ 5?.
а) Определите места присоединения (отжига) праймеров.
б) Стрелками укажите направление синтеза новых цепей ДНК.
в) Определите размер фрагмента ДНК-мишени в нуклеотидных парах.
г) В каком цикле ПЦР образуются матрицы, точно соответствующие длине ДНК-мишени?
4. На рис. 15.1 представлены результаты секвенирования фрагмента ДНК. Прочитайте последовательность изучаемого фрагмента ДНК.
Рис. 15.1. Результаты секвенирования фрагмента дезоксирибонуклеиновой кислоты
5. На рис. 15.2 представлены результаты секвенирования фрагмента гена N здорового и больного человека. Прочитайте последовательности фрагмента гена N у здорового и больного человека. Сравните полученные результаты. Определите мутацию в гене N у больного человека. К какому типу относится эта мутация?