Тема «Рекомбинантные белки» посвящена методологии генной инженерии по созданию штаммов-продуцентов видоспецифических белков человека, которые в дальнейшем применяют в качестве лекарственных препаратов. Рассмотрен мини-препаративный метод разрушения клеток E. coli, содержащих внедренную плазмидную ДНК, последующее ее отделение от содержимого клеточного аппарата и идентифицирующий электрофоретический анализ полученной плазмидной ДНК в агарозном геле.
Цель изучения темы: предлагаемые к практическим занятиям материалы по биотехнологии позволяют студентам ознакомиться с некоторыми аспектами деятельности генных инженеров, занятых как в области фундаментальных исследований биотехнологии, так и в производственной практике.
Данная тема представлена одним семинарским занятием, которое включает краткую теоретическую часть, задание для самоподготовки к практическому занятию, описание проведения лабораторной работы.
На занятии выполняется лабораторная работа: «Выделение и анализ плазмидной ДНК», состоящая из двух частей:
• разрушение клетки, отделение плазмидного вектора (ДНК);
• анализ штамма JM-109 E. coli на присутствие вектора, продуцирующего видоспецифический белок человека - инсулин.
Занятие проводится на базе Учебно-научного центра Института биоорганической химии (ИБХ) РАН им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова.
Проблематика данного занятия тесно связана с деятельностью производственного отдела ИБХ, являющегося небольшим заводом, приоритетное направление деятельности которого - производство инсулина. Препарат на продажу, производство которого осуществляют в ИБХ РАН, носит название инсуран*.
Занятие построено по следующему плану: вводная беседа преподавателя, проверка подготовленности к занятию с использованием вопросов для самопроверки, методические указания преподавателя перед выполнением лабораторной работы, индивидуальное выпол-