Диагностика C. difficile-ассоциированной болезни основана на анализе характерных симптомов и выявлении токсинов C. difficile или токсигенных штаммов бактерии в испражнениях больных. Обнаружение токсинов C. difficile проводят в фекалиях пациентов с диареей (сила рекомендаций А) [15, 23].
В настоящее время предлагается несколько лабораторных методов для диагностики клостридиальной инфекции, однако ответ на вопрос, какой из них можно считать «золотым стандартом», пока не получен.
Иммуноферментный анализ для определения токсинов А/В C. difficile в кале. Это наиболее широко распространенный диагностический тест, чувствительность которого составляет 75–95%, специфичность 83–98% [51,52].
Исследование глутаматдегидрогеназы (GDH)
C. difficile. Глутаматдегидрогеназа — фермент, продуцируемый как токсигенными, так и нетоксигенными штаммами C. difficile, в связи с чем этот тест не позволяет дифференцировать наличие именно токсигенного штамма у конкретного пациента.
Тест амплификации нуклеиновых кислот (полимеразная цепная реакция) для токсигенного штамма C. difficile. Метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью, но в нашей стране он менее доступен для клинической практики.
В некоторых клинических рекомендациях предлагается комбинировать тесты в двухили трехступенчатом алгоритмах диагностики клостридиальной инфекции. Например, в качестве первичной ступени проводят исследование GDH
C. difficile. В случае отрицательного результата дальнейшее обследованиея больного не требуется, при положительном необходимо проведение тестов, подтверждающих наличие определенных токсинов (ПЦР или ИФА) [23, 52].
Следует избегать одних и тех же повторных исследований в том случае, если результаты первого теста были отрицательными. При последующих исследованиях повышается вероятность получения ложноположительных результатов [53]. Нецелесообразно проводить повторные лабораторные исследований после курса терапии; при наступлении клинического улучшения тесты на основе ИФА могут оставаться положительными на протяжении 30 дней.
В том случае если у пациента развилась клиническая картина C. difficile-ассоциированной болезни, лечение может быть начато до получения лабораторного подтверждения. Отрицательные результаты лабораторных тестов не исключают диагноза [15].
Колоноскопия. Классическая эндоскопическая картина псевдомембранозного колита (ПМК) представлена очаговыми плотно спаянными с подлежащей слизистой оболочкой желто-зелеными или желтоватыми наложениями, между которыми отмечаются участки с гиперемированной слизистой. При попытках удаления пленок, обнажаемая поверхность кровоточит. Часто наложения описываются как бляшки, имеющие диаметр от нескольких миллиметров до 1–2 см. При прогрессировании процесса наложения сливаются и полностью покрывают поверхность слизистой оболочки, которая подвергается некрозу и при отторжении экссудата становится изъязвленной [5, 54].
Морфологическая диагностика. Следует отметить, что гистологическое исследование биоптатов не служит необходимым условием для установления диагноза при C. difficile-ассоциированной болезни, однако может быть крайне важным для дифференциальной диагностики.
При первой стадии ПМК определяются скопления фибрина, муцина и нейтрофилов на участках между криптами. При второй стадии поверхностная часть крипт оказывается включенной в мембрану. Эпителий нижних отделов крипт сохранен, а просвет их расширен. При третей стадии ПМК слизистая оболочка и подслизистый слой некротизированы, замещены массами фибрина со скоплениями нейтрофилов, видны многочисленные кровоизлияния в слизистой оболочке; в более глубоких отделах (мышечный слой) обнаруживаются полнокровные сосуды, кровоизлияния, лимфоцитарная инфильтрация преимущественно очагового характера [5].