Из жидких биологических сред при освидетельствовании для установления факта употребления алкоголя и алкогольного опьянения наиболее часто исследуют мочу и слюну. Кровь для определения алкоголя можно забирать только при выявлении соответствующих медицинских показаний.
Оценивая результаты исследований, следует иметь в виду, что даже при одновременном отборе проб различных биологических жидкостей количество алкоголя в них может быть неодинаковым. Это обусловлено рядом причин: во-первых, плотностью среды и количеством в ней воды. В связи с гидрофильностью алкоголя при равных условиях в среде с большим содержанием воды больше и алкоголя. Например, если определить концентрацию алкоголя в цельной крови, плазме и эритроцитарной массе из одной и той же пробы крови, то соответственно наибольшее количество определяемого вещества будет в плазме, меньшее - в цельной крови, ещё меньшее - в эритроцитарной массе. Во-вторых, имеет значение фаза опьянения. В фазе резорбции наибольшую концентрацию алкоголя выявляют в артериальной крови. В этой фазе алкоголь проникает из артериальной крови в ткани; в венозной крови, оттекающей от тканей, его концентрация ниже. В фазе резорбции артериовенозная разница по алкоголю при высоких концентрациях его в крови может достигать 0,6‰. Что касается мочи, то её проба из мочеточников содержит алкоголя примерно столько же, сколько и омывающая почки кровь. Поскольку на практике для пробы отбирают пузырную мочу, то концентрация алкоголя в ней зависит от времени отбора пробы и промежутка, предшествующего опорожнению мочевого пузыря, так как в нём идёт постоянное смешивание порций мочи, поступающей в различные фазы опьянения. Тем не менее определённо известно, что в фазе резорбции концентрация алкоголя в пузырной моче всегда ниже, чем в крови. В фазе элиминации содержание алкоголя в моче может быть выше, чем в крови. Наконец, после опьянения, когда в крови экзогенный алкоголь уже не обнаруживают, его всё ещё можно определить в моче. Содержание эндогенного алкоголя в крови при хроматографическом его определении, согласно литературным данным, не превышает 0,02 ‰. Результаты исследования во многом зависят от точности выполнения методики отбора проб биологической жидкости, условий хранения и транспортировки, погрешности метода, ошибок при проведении исследований. С учётом сказанного обнаружение алкоголя в биологической жидкости в концентрации ниже 0,2 ‰ не может достоверно свидетельствовать о факте употребления алкоголя.