Источники ГСК:
= костный мозг;
= периферическая кровь;
= пуповинная кровь.
Классическим источником ГСК для практического применения долгое время оставался костный мозг, являющийся центральным гемопоэтическим органом. Эксфузию костного мозга проводят в условиях операционной под общей или перидуральной анестезией. Выполняют множественные пункции гребня подвздошной кости с обеих сторон. Костный мозг аспирируют в шприцы, содержащие антикоагулянт, и содержимое каждого шприца переносят в коллекционный мешок с консервантом. Необходимый объём костномозговой взвеси рассчитывают на основании её клеточности и массы тела реципиента. Для адекватного восстановления кроветворения после высокодозной химиотерапии трансплантат должен содержать не менее 3x108 ядросодержащих клеток на 1 кг массы тела реципиента.
В настоящее время в клинической практике в качестве альтернативного источника ГСК широко используют периферическую кровь. В норме клеткипредшественники циркулируют в кровяном русле в чрезвычайно малых количествах, однако их содержание в крови может многократно увеличиваться под влиянием колониестимулирующих факторов и на фоне восстановления кроветворения после химиотерапии. Концентрация ГСК в крови становится таковой, что появляется возможность получения достаточного их количества при помощи лейкоцитаферезов. Для выделения ГСК из крови методом лейкоцитафереза используют клеточные сепараторы с непрерывным (Cobe Spectra, Gambro; CS 3000 plus, Baxter; Amicus Separator, Baxter) и прерывистым (MCS plus, Haemonetics) током крови. За одну процедуру обрабатывают от 2 до 4 объёмов циркулирующей крови и получают 160-200 мл лейкоконцентрата. В настоящее время содержание ГСК в крови и в лейкоконцентратах определяют по количеству клеток, несущих на своей мембране CD34антиген. Этот антиген присутствует на примитивных и на более дифференцированных клеткахпредшественниках, но отсутствует на зрелых гемопоэтических клетках. Определение количества CD34+клеток в крови и в лейкоконцентратах осуществляют методом проточной цитофлюориметрии. Этот метод позволяет получать оперативную информацию об изменении содержания ГСК в крови в процессе стимуляции их "выхода" из костного мозга в кровяное русло и планировать сроки проведения процедур лейкоцитаферезов, поскольку количество CD34+клеток в периферической крови хорошо коррелирует с количеством CD34+клеток в получаемом лейкоконцентрате. Содержание CD34+клеток в трансплантате - один из главных критериев, определяющих возможность успешного восстановления кроветворения после высокодозной химиотерапии. Оптимальное количество гемопоэтических клеток, обеспечивающих быстрое и стабильное восстановление гемопоэза после высокодозной химиотерапии, -