23.3.3.4. Измерение содержания гемоглобина
Для измерения содержания гемоглобина существует много методов, в том числе:
- определение количества связанного О2 (1 г гемоглобина может присоединить до 1,36 мл О2);
- анализ уровня железа в крови (содержание железа в гемоглобине составляет 0,34%);
- колориметрия (сравнение цвета крови с цветом стандартного раствора);
- измерение экстинкции (спектрофотометрия).
Принцип метода состоит в определении содержания Нb в крови по экстинкции монохроматического света.
E = lg(I0/I), (23.19)
где I0 — интенсивность падающего света; I — интенсивность прошедшего света.
Экстинкцию удобно использовать в связи с тем, что она прямо пропорциональна концентрации растворенного вещества С:
E = lg(I0/I) = eCd, (23.20)
где d — толщина слоя раствора; e — коэффициент экстинкции (величина, постоянная для каждого вещества). Линейная зависимость между экстинкцией, концентрацией и толщиной слоя раствора называется законом Ламберта–Бера. Этот закон справедлив только для монохроматического света.
При проведении рутинных определений уровня гемоглобина отдают предпочтение последнему методу, так как при использовании первых двух способов необходима сложная аппаратура, а метод колориметрии неточен.