В настоящее время установлено, что бактерия Helicobacter pylori является причиной развития хеликобактерного хронического гастрита, важнейшим фактором патогенеза язвенной болезни ДПК и желудка, лимфомы желудка низкой степени злокачественности (мальт-лимфомы), а также РЖ. Лечение ряда заболеваний гастродуоденальной зоны включает в себя в качестве обязательного компонента проведение эрадикационной терапии в случае обнаружения у больных в СО желудка HР.
С момента открытия НР было разработано большое количество методов диагностики, позволяющих выявлять и идентифицировать этот микроорганизм. Развитие и усовершенствование этих методов помогло в получении ценной информации об эпидемиологии хеликобактериоза, сыграло большую роль в понимании патогенеза этой инфекции. Тем не менее, ни один из существующих методов диагностики НР-инфекции не универсален. Пределы возможностей этих методов могут быть ограничены не только их чувствительностью, но, зачастую зависят от возраста пациента, его индивидуальных особенностей, стадии заболевания, а также индивидуальных особенностей течения инфекции.
Все существующие на сегодняшний день методы лабораторного определения НРинфекции делятся на две большие группы: инвазивные методы и неинвазивные.
Таблица 7. Методы лабораторной диагностики Helicobacter pylori инфекции
| Инвазивные методы | Неинвазивные методы |
- Бактериологический метод
- Гистологический метод
- Быстрый уреазный тест
- Молекулярно-биологический метод (ПЦР в биоптате)
- Фазово-контрастная микроскопия
| - Серологический метод
- Молекулярно-биологический метод (ПЦР в кале, слюне)
- Уреазный дыхательный тест
- ИФА в кале
|
Все инвазивные методы диагностики НР-инфекции предусматривают проведение эндоскопического исследования с взятием биопсийного материала. Неинвазивные методы включают в себя различного рода иммунологические исследования, позволяющие определять наличие антител в сыворотке крови или бактериального антигена в фекалиях, ПЦР исследование на НР с определением ДНК Н.pylori в фекалиях и уреазный дыхательный тест на НР с С13 или С14 меченым атомом углерода.
Принципиальное значение для практики имеет проведение диагностики Н.pylori-инфекции до лечения – первичная диагностика, и после проведения противохеликобактерной терапии – контроль эффективности выбранной схемы лечения.
В международной практике наиболее значимыми (референсными) методами диагностики инфекции НР служат дыхательный тест с мочевиной, меченной 13С и определение антигена НР в кале. В силу малой доступности этих методов диагностики для первичного диагноза целесообразно применять любую методику, которая имеется в распоряжении врача. Необходимо учитывать, что лечение ингибиторами протонной помпы может привести к ложноотрицательным результатам диагностических тестов. Поэтому рекомендуется отменить ингибиторы не менее чем на 2 недели до проведения диагностики инфекции НР. Серологические методы исследования антитела к НР могут быть назначены в качестве первичной диагностики инфекции, в том числе после недавнего приема антисекреторных или антибактериальных лекарственных средств (Ивашкин В.Т., Лапина Т.Л., 2013).
Диагностика успешности эрадикационной терапии НР должна осуществляться не ранее, чем через 4 недели после окончания курса антихеликобактерной терапии, либо после окончания лечения любыми антибиотиками или антисекреторными средствами сопутствующих заболеваний. Серологические методы определения антител к НР в этой ситуации неприменимы. В случае отсутствия референсных методов диагностики целесообразно комбинировать доступные диагностические тесты или, при применении методов непосредственного обнаружения бактерии в биоптате СО желудка (бактериологический, морфологический, быстрый уреазный тест), необходимо исследование хотя бы 2-х биоптатов из тела желудка и 1-го биоптата из антрального отдела желудка (Ивашкин В.Т., Лапина Т.Л., 2013).
Если говорить о тенденциях в развитии методов диагностики, то в последние годы произошел сдвиг в сторону неинвазивных методов, где достигнут наибольший прогресс.
Характеристика некоторых методов диагностики НР – инфекции
1. Бактериологический метод: посев биоптата СО желудка или двенадцатиперстной кишки на дифференциально-диагностическую среду с целью выделения чистой культуры НР. Это единственный метод исследования, обладающий 100% специфичностью.
Недостатки метода: необходимость специального оборудования лаборатории и реактивов, специальных питательных сред, а также обученных специалистов, что влечет за собой большие материальные затраты; результаты исследования отсрочены от момента взятия биопсийного материала от 3 до 7 дней; инвазивность (необходимо проведение ЭГДС с взятием биопсийного материала).
Правила взятия и доставки биопсийного материала:
Для бактериологического исследования необходимо взятие не менее двух биопсийных образцов из тела и антрального отдела желудка. Оптимальным считается взятие 3-х биопсийных образцов. Обычно фрагменты СО желудка берутся из антрального отдела желудка по вершинам воображаемого равностороннего треугольника с привратником в центре, на расстоянии 2-4 см от него; из тела желудка по большой и малой кривизне и из свода желудка.
Поскольку Н.pylori – микроаэрофил и очень чувствителен к условиям внешней среды (при избытке кислорода быстро погибает), необходимо строго соблюдать правила транспортировки биопсийного материала на бактериологическое исследование для того, чтобы сохранить этот микроорганизм в жизнеспособном состоянии. Лучшей, в настоящее время, для транспортировки биопсийных образцов признана Pylori-среда (BioMerioux, Франция), которая способна стабильно поддерживать жизнеспособность Н.pylori в биопсийном материале до 2-х суток.
2. Гистологический метод – «золотой стандарт» диагностики НР инфекции, так как позволяет обнаружить возбудителя этой инфекции, определить положение бактериальных тел в слизи, покрывающей СО желудка, наблюдать взаимоотношение НР с апикальной мембраной эпителиоцитов, а также определить пути взаимодействия микроба с тканями макроорганизма.