Артефакты окраски

Артефакты окраски можно разделить на две большие группы: неполное или частичное окрашивание при качественных красителях, преципитация красителей или загрязнение материала компонентами красителей. Неполное окрашивание в большинстве случаев выявляется в виде участков материала, лишенных окраски полностью или частично.

НЕПОЛНАЯ ДЕПАРАФИНИЗАЦИЯ

Остатки парафина в срезах препятствуют проникновению в ткань водо- и спирторастворимых красителей, что проявляется в виде неокрашенных или неравномерно окрашенных участков препарата (рис. 106). Не полностью удаленный парафин может исказить окрашивание среза, снизить качество окраски («мутное ядро»).

Рис. 106. Недостаточная депарафинизация среза. Неокрашенные или неравномерно окрашенные участки срезов (приводится по G. Rolls [19])

Данный артефакт хорошо выявляется при микроскопии и может быть исправлен повторной депарафинизацией с последующим повторным окрашиванием.

НЕПОЛНОЕ ОКРАШИВАНИЕ СРЕЗА

Неравномерное окрашивание среза одним из красителей при сложных окрасках с использованием автостейнеров может быть обусловлено недостаточным наполнением реагентных емкостей (рис. 107).

Рис. 107. Неполная окраска среза, связанная с недостаточным наполнением реагентной емкости. Окраска гематоксилином и эозином, x50

НЕРАВНОМЕРНОЕ ОКРАШИВАНИЕ СРЕЗА

Неокрашенные или слабо окрашенные области на срезе могут появляться, когда остатки реагентов предыдущих этапов обработки при недостаточно тщательной отмывке переносятся со стеклом в последующие реагентные емкости.

Например, если при депарафинировании препаратов растворитель, оставшийся на срезе, не полностью отмывается в спирте (это возможно, если уровень спирта в реагентной емкости ниже уровня ксилола) или если стекла слипаются в растворителе. При последующей обработке в водных растворах красителей ксилол, который не смешивается с водой, может скапливаться на поверхности среза, ограничивая доступ красителя к ткани.