Фиксация

КАЧЕСТВО ФИКСАЦИИ ОБРАЗЦА

Образец необходимо помещать в фиксирующий раствор немедленно после взятия. Важно, чтобы кусочки оставались незафиксированными максимально короткое время. Флаконы с материалом следует содержать при температуре не менее +4 °C.

При отложенной фиксации дегенерация компонентов ткани начинается сразу после того, как ткань лишается кровоснабжения (рис. 38).

Рис. 38. Аутолитические изменения ткани. Окраска гематоксилином и эозином, х200

ОБЪЕМ ФИКСИРУЮЩЕГО РАСТВОРА И РАЗМЕР КОНТЕЙНЕРА

Соотношение объема фиксирующего агента и тканевого образца должно быть не менее 20:1. Для этого необходимо правильно подбирать размер контейнера (рис. 39).

Рис. 39. Несоответствие объема фиксирующего раствора и размера контейнера объему помещенной в него ткани

При использовании контейнеров неадекватно малого размера возможны механическое повреждение, деформация и недостаточная фиксация образца (снижение объема фиксирующей жидкости меньше, чем 20:1).

рН ФИКСИРУЮЩЕГО РАСТВОРА

Оптимальным для фиксации в текущей гистологической практике для решения большинства диагностических задач является раствор формалина, забуференный при рН 6,8-7,0. Не рекомендуется использовать фиксирующие растворы с неустановленным рН. Кислый формалин приводит к образованию в ткани так называемого формалинового пигмента бурого цвета, как следствие взаимодействия с гемоглобином (рис. 40). При решении некоторых диагностических задач требуется приложение дополнительных усилий для идентификации химической природы этого пигмента, что может привести к существенному удорожанию исследования.

В качественных гистологических препаратах формалинового пигмента быть не должно.

Для лабораторного приготовления забуференного формалина рекомендуется использовать пропись R.D. Lillie [19]. Однако наиболее предпочтительно использование стандартизованных готовых растворов формалина для гистологии, выпускаемых многими производителями. Использование готовых фиксирующих смесей позволяет стандартизовать процедуру и варьировать лишь временем экспозиции в зависимости от особенностей