Методы классической цитогенетики, основанные на анализе метафазных хромосом, являются высокоинформативными и сравнительно недорогими, однако, они могут применяться только в тех случаях, когда имеется возможность получения делящихся клеток в культуре. Выявление цитогенетических нарушений в неделящихся клетках (интерфазных ядрах) стало возможно только с появлением молекулярно-генетической технологии гибридизации in situ. Метод базируется на использовании меченных флюоресцентными красителями ДНК-проб, специфичных для центромерных районов или уникальных последовательностей хромосом, что позволяет выявлять числовые или структурные хромосомные аномалии. В процессе малигнизации может происходить как увеличение количества, так и утрата генетического материала или его реаранжировки, что выражается в одних случаях в изменении числа, а в других цвета - флюоресцентных сигналов.
В настоящее время разработан ряд молекулярно-цитогенетических тестов, с успехом применяемых на практике для ранней диагностики онкологических заболеваний. Среди них - метод молекулярно-генетической диагностики рака мочевого пузыря, основанный на использовании патентованного набора флюоресцентных зондов UroVysion и получивший название UroVysion тест. Этот метод является неинвазивным (анализируются клетки мочевого пузыря, полученные из образца мочи). Высокая диагностическая ценность метода, продемонстрированная в результате многоцентровых испытаний, неинвазивный характер исследования, отсутствие противопоказаний (тест может использоваться и после БЦЖ терапии) послужили основанием для внедрения UroVysion теста в клиническую практику, как на этапе первичной диагностики, так и для выявления рецидивов рака мочевого пузыря.
Опережение диагностики рецидива заболевания с помощью UroVysion теста в сравнении с классическими методами диагностики рака мочевого пузыря опосредовано природой возникновения онкологических заболеваний. Цитогенетические изменения имеются уже на самых ранних этапах малигнизации, предшествующих микроскопическим и макроскопическим проявлениям опухоли. Поэтому молекулярно-цитогенетическое исследование способно обнаружить рецидив рака до того, как клинические проявления заболевания становятся очевидными при цистоскопии. Выигрыш во времени выявления рецидивов заболевания при использовании молекулярно-цитогенетических технологий в некоторых случаях составляет до 6 месяцев.
Технология выполнения UroVysion теста подробно излагается в прилагаемых к набору реактивов инструкциях. Необходимо точно следовать указаниям фирмы-изготовителя набора, так как только в этом случае будет обеспечено получение достоверных результатов.
В ФГБУ ВЦЭРМ им. A.M. Никифорова МЧС России в течение нескольких лет проводится выполнение UroVysion теста. На основании полученного опыта рекомендуется особое внимание уделять забору материала (образцов мочи) для приготовления препаратов: моча должна содержать минимальное количество посторонних включений - солей, бактерий и т.д. В случае получения образца мочи неудовлетворительного качества целесообразно повторить забор материала после того, как больной выпьет большой объем жидкости и промоет мочевой пузырь.
Молекулярно-цитогенетические исследования являются высокоэффективными и при раке молочной железы. FISH исследования в экономически развитых странах включены в обязательный протокол обследования при данной патологии.
FISH-исследование при раке молочной железы производится с помощью наборов специфических ДНК зондов, в состав которых входят пробы LSI® HER-2/new и СЕР® 17. Технология выполнения теста подробно излагается в прилагаемых к набору реактивов инструкциях. Анализ является быстрым, нерадиоактивным, требует небольшого количества материала опухолевой ткани. Он может быть проведен как на свежем материале биопсий, так и на гистологических препаратах. Как показывает опыт нашей работы, при проведении FISH гибридизации на гистологических препаратах принципиально важна правильность подготовки материала (условия фиксации, приготовления парафиновых блоков и крепление препаратов на предметном стекле).
НИЛ генетической диагностики и биодозиметрии внедрены в практику FISH - диагностика при раке желудка, пищеводе Баррета, раке легкого. Ведутся работы по внедрению в практику методов молекулярно-генетической диагностики онкологических заболеваний и предраковых состояний желудочно-кишечного тракта, щитовидной железы, печени и желчевыводящих путей, рака простаты и других видов онкопатологии.
Наиболее широкое применение FISH диагностика получила в онкогематологии. Это направление исследований успешно развивается не только за рубежом, но и в нашей стране. В настоящее время во ВЦЭРМ выполняется более 15 FISH-тестов для диагностики наиболее часто встречающихся онкогематологических заболеваний.