Профессиональная деятельность сотрудников государственной противопожарной службы (ГПС) связана как со стрессом, так и с воздействием неблагоприятных факторов условий труда.
Для определения нарушений в иммунной системе специалистов ГПС, обусловленных профессиональной деятельностью данной категории лиц были обследованы 98 человек с учетом профессиональной нагрузки.
В группу 1 (42 человека) вошли сотрудники специализированной части ГПС в возрасте от 22 до 48 лет. Данная пожарная часть производит выезды на пожары повышенной сложности, аварийные выбросы веществ химической природы, ДТП, глубинные работы.
В группу 2 (56 человек) вошли сотрудники ГПС в возрасте от 25 до 53 лет частей № 7, № 9, № 17, № 36. Данные части производят выезды на все виды пожаров, возникающие на территории города и области.
Материалом для исследований явились цельная кровь и сыворотка крови.
Исследование фенотипического состава NK-клеток периферической крови проводили методом проточной цитометрии (Cytomics FC500, Navios, Beckman-Coulter, США) с применением прямой иммунофлуоресценции цельной периферической крови в многоцветном анализе с использованием моноклональных антител к CD3, CD16, CD56 и соответствующих изотипических контролей (Beckman-Coulter, США) по безотмывочной технологии с применением для лизиса эритроцитов лизирующего раствора Versalyse (Beckman-Coulter, США). В лимфоцитарном гейте анализировали 3000 событий. Выделение лимфоцитарной популяции проводили на основании параметров прямого и бокового светорассеяния.
Цитотоксическую активность NK-клеток исследовали методом проточной ДНК- цитометрии. Оценку цитотоксической активности NK-клеток проводили на выделенных мононуклеарах периферической крови с использованием в качестве клеток-мишеней клетки линии К-562 на второй день после пересева. Метод основан на разнице модальных чисел хромосом лимфоцитов человека и клеток линии К-562, отличающихся в 1,47 раз. Для учета реакции использовали ДНК-цитометрию. Анализ проб проводили на проточном цитометре EPICS XL (Beckman Coulter). Оценивали ДНК гистограммы контрольных и опытных проб, анализировали в программе MultiCycle AV ver. 3 (Beckman Coulter). В каждой пробе оценивали 10 тыс. событий. Цитотоксическую активность натуральных киллерных клеток оценивали по формуле и выражали в процентах:
% клеток К-562 в фазах G2+S в контрольной пробе - % клеток К-562 в фазах G2+S в опыте
% клеток К-562 в фазах G2+S в контрольной пробе
Определяли уровни секреторного иммуноглобулина А (sIgA) и общего иммуноглобулина Е (IgE) в сыворотке крови, sIgA в слюне методом ИФА (Полигност, Россия).
Для изучения целесообразности определения опухолеассоциированных антигенов в биологических средах с целью диагностики РМП и мониторирования рецидивов исследовали уровни опухолеассоциированных антигенов, материалом служили моча и сыворотка крови.
Критериями исключения явились острые или обострение хронических инфекционных заболеваний, заболевания печени, беременность.
При выборе пациентов учитывались данные литературы о повышении уровней сывороточных маркеров TPS и TPA cyk у пациентов с воспалительным процессом, сопровождающимся нарушением целостности слизистых, эритроцитурией, пролиферацией эпителия слизистых.
Обследовано 52 человека, из них 14 женщин, 38 мужчин. Возраст пациентов колебался от 19 до 81 года.
В 1-ю группу (16 человек) вошли пациенты с диагнозом мочекаменная болезнь (МКБ), из них 3 человека в фазе ремиссии, 13 человек с обострением.
У 2-х пациентов с МКБ диагностирован полип почки, у 1-го - полип мочевого пузыря, РМП в анамнезе.
Вторую группу – (32 человек) – группу сравнения – составили пациенты с аденомой простаты (4), с хроническим простатитом в ремиссии (6), с раком простаты (2), хроническим холециститом в ремиссии (1), хроническим пиелонефритом в обострении (6), с хроническим циститом в ремиссии, хроническим пиелонефритом в ремиссии (9), с гематурией, РМП (2), с гематурией, подозрением на РМП (1), с варикоцеле, варикозной болезнью (1). Дополнительно были обследованы 4 пациента с ИППП в анамнезе, получившие адекватную терапию.
Для определения концентрации цитокератинов TPAcyk, TPS осуществляли забор крови из вены в объеме 4-5 мл, кровь центрифугировали в течение 10 минут при 1000 об/мин. Сыворотку крови замораживали и хранили при температуре минус 18°С. Перед проведением исследования сыворотку размораживали при комнатной температуре.
С целью определения концентрации UBC собирали утреннюю порцию мочи, находившуюся в мочевом пузыре не менее 3 часов. Пробирку с мочой центрифугировали при 1000 об/мин в течение 10 мин, замораживали и хранили при температуре минус 20 ° С. Перед непосредственным проведением анализа образцы мочи размораживали при комнатной температуре.
Уровень сывороточных и уринарного маркеров определяли по методике фирмы изготовителя IDL Biotech AB, Швеция методом иммуноферментного анализа. Чувствительность использованных наборов составила: TPS < 6 u/l, TPAcyk 0,1 ng/ml, UBC 0,1 mkg/l. Нормативные значения в инструкциях к наборам: UBC (моча) менее 10 mkg/l, TPS (кровь) менее 110 u/l, TPAcyk менее 2 ng/ml.
Статистическую обработку результатов исследования проводили в аналитической системе Statistica 6.0.