Поиск
Озвучить текст Озвучить книгу
Изменить режим чтения
Изменить размер шрифта
Оглавление
Для озвучивания и цитирования книги перейдите в режим постраничного просмотра.

Лекция 3. Общие принципы иммуногистохимической диагностики опухолей человека

Стремительное развитие знаний о природе злокачественных новообразований в последние годы обусловило определенные достижения в диагностике и терапии данной патологии. Оценка опухолевого роста в настоящее время основывается на комплексном клинико-морфологическом анализе с привлечением молекулярных методов исследований (цитогенетических, биологических, иммуногистохимических). Считается, что около четверти всех злокачественных опухолей требует применения дополнительных методов морфологической диагностики (гистохимии, иммуногистохимии, электронной микроскопии, гибридизации in situ). Это касается в первую очередь лимфом, мягкотканных сарком, анапластических (недифференцированных) опухолей и их метастазов.

Гибридомная технология позволила достичь значительных успехов в изучении иммунофенотипа солидных и других новообразований человека. Для ИГХ анализа опухолей и их метастазов применяется широкий спектр маркеров, к которым можно отнести: тканеспецифичные [белки промежуточных филаментов (ПФ), компоненты базальной мембраны, рецепторы и др.], цитоспецифичные (CD-антигены, факторы транскрипции, миоглобин, тиреоглобулин и др.), маркеры пролиферации (Ki-67 и др.), опухолеассоциированные антигены [раковый антиген (cancer antigen — CA) 15-3, CA-125, CA 19-9 и др.], опухолевые маркеры: онкофетальные антигены (α-фетопротеин, раково-эмбриональный антиген и др.), гормоны, ферменты, а также белковые продукты клеточных онкогенов, генов-супрессоров, генов репарации ДНК, вирусных онкогенов и др. Некоторые иммуногистохимические маркеры имеют специфическую ультраструктурную локализацию, в то время как другие располагаются либо в нескольких типах органелл, либо в цитозоле или внеклеточно.

Анапластические опухоли — злокачественные новообразования различного цитогенеза, состоящие из недифференцированных клеток, в первую очередь требуют детального молекулярного исследования для диагностики. Наиболее часто для ИГХ анализа анапластических опухолей человека используют антитела к белкам ПФ. С помощью биохимической и иммунологической техники белки промежуточных филаментов были разделены на 6 групп. Первую группу составляют кислые цитокератины с молекулярной массой 40–64 кДА, которые имеют порядковые номера по каталогу цитокератинов R. Moll N 9–20; вторую — цитокератины N 1–8 (нейтрально-основные) с молекулярной массой 52,5–68 кДА. К третьей группе относят виментин (молекулярная масса 58 кДА) мезенхимальных клеток, десмин мышечных клеток (молекулярная масса 54 кДА), глиальный фибриллярный кислый белок (55 кДА) и периферин. Несмотря на антигенные различия, эти протеины имеют значительное сходство в первичной структуре центральных доменов. В четвертую группу входят белки нейрофиламентов, имеющие массу 68, 145 и 220 кДА, и α-интернексин. К пятой группе относят ядерные ламины типа А и В. В шестую группу входит белок нестин. Белки ПФ отличаются тем, что они не подвергаются в клетке циклическим превращениям, как это происходит с актиновыми филаментами и микротрубочками. Взаимодействуя с плазматической мембраной и оболочкой ядра, ПФ играют в клетки больше механическую, чем динамическую роль. Виментин экспрессируется на фибробластах, остеоцитах и остеобластах, хондроцитах, шванноских клетках, меланоцитах кожи, некоторых типах лимфоцитов, плазматических клетках. Десмин найден в клетках скелетных мышц, кардиомиоцитах, гладкомышечных клетках висцеральных органов и кровеносных сосудов. Глиальный фибриллярный кислый белок является маркером астроглиальных клеток. Белок периферин найден в нейронах периферической нервной системы, а также в эндокринных раках кожи. Ламины типа А и типа В формируют оболочку ядра, и их экспрессия связана со степенью дифференцировки клетки. В клетках, не достигших конечной стадии дифференцировки, экспрессируются ламины только типа В. Нестин экспрессируется в стволовых клетках нейроэпителия.

Наиболее многочисленной группой белков ПФ являются цитокератины. Различные варианты эпителия имеют специфические наборы цитокератинов, и спектр экспрессируемых цитокератинов в эпителиальных клетках зависит от типа дифференцировки, положения клетки в эпителиальном пласте. Широко распространено представление о связи между гистогенезом эпителиальной ткани и экспрессией цитокератинов. В многослойных эпителиях экспрессируются в основном высокомолекулярные кератины 54, 56, 59, 64, 68 кДА, отсутствующие в однослойных эпителиях. Последние, в свою очередь, экспрессируют относительно низкомолекулярные кератины 40, 45, 52 кДА. Таким образом, присутствие цитокератинов в клетках является признаком, который может быть использован для идентификации эпителия: каждому виду эпителиальных клеток с определенной функцией и локализацией соответствует характерный набор цитокератиновых полипептидов.

В новообразованиях человека установлены определенные закономерности экспрессии белков ПФ.

  1. В опухолях и их метастазах в основном сохраняется тканеспецифическая экспрессия генов белков ПФ (цитокератины — в раках, десмин — в мышечных саркомах и т.д.).
  2. Гистологическая дифференцировка раковой опухоли коррелирует с синтезом специфических цитокератинов.
  3. Различные наборы цитокератинов позволяют разделять раковые опухоли по их происхождению, направлению и уровню дифференцировки.
  4. Информация, полученная при ИГХ анализе белков ПФ, независима от морфологических данных, поэтому эти маркеры используют для исследования низкодифференцированных новообразований с одинаковыми морфологическими характеристиками.

Положительные на виментин и цитокератин-негативные недифференцированные мягкотканные опухоли являются новообразованиями мезенхимальной природы (лимфомы, саркомы), некоторыми нейрогенными опухолями либо меланомами. Для анализа сарком рекомендуется использовать алгоритм ИГХ диагностики (десмин, актин, фактор VIII, миоглобин и др.).

В тех наблюдениях, когда выявляется позитивная реакция на виментин и белок S100, опухоль оценивается в дальнейшем как меланома, шваннома или липосаркома. Если положительная окраска на виментин сочетается с реакцией на общий лейкоцитарный антиген, то предполагается лимфома.

Иммуногистохимическая диагностика лимфом основана на постулате существования так называемого неопухолевого аналога, установленного для большинства В- и Т-лимфоидной клетки на любом этапе коммитации/дифференцировки, что и определяет иммунофенотипическую характеристику лимфом. Иммунофенотип лимфомы отражает тот этап генетического и соответствующего ему иммунофенотипического «созревания», на котором в силу молекулярно-генетических событий произошел «блок» дифференцировки лимфоидной клетки, активация пролиферативного потенциала и формирование опухолевого клона.

Для продолжения работы требуется Registration
На предыдущую страницу

Предыдущая страница

Следующая страница

На следующую страницу
Лекция 3. Общие принципы иммуногистохимической диагностики опухолей человека
На предыдущую главу Предыдущая глава
оглавление
Следующая глава На следующую главу

Table of contents

Данный блок поддерживает скрол*