10. Специфическая лабораторная диагностика SARS-CoV-2-инфекции

Поставить закладку

Этиологическая верификация коронавирусной инфекции проводится на основании выявления:

РНК SARS-CoV-2 с применением ПЦР-диагностики — методов амплификации нуклеиновых кислот — «золотого стандарта» диагностики;
антигена SARS-CoV-2 c применением иммунохроматографических методов — используется как экспресс-диагностика — скрининг-тест;
иммуноглобулинов классов А, M, G (IgА, IgM и IgG) к SARS-CoV-2 (в том числе к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина) — имеет ретроспективное значение, так как IgM- и IgG-антитела к SARS-CoV-2 появляются только на 2-й неделе болезни.

Современные способы диагностики инфекционных заболеваний определяют либо присутствие фрагментов вирусов в материале, либо наличие иммунного ответа организма к инфекции (табл. 3). Полимеразную цепную реакцию в реальном времени применяют для диагностики COVID-19 чаще всего. Такой высокочувствительный тест показывает присутствие в исследуемом образце фрагмента генома SARS-CoV-2. Результаты полимеразной цепной реакции в реальном времени зависят от материала, из которого выделяли геном вируса, а также от периода развития инфекции. Исследования с использованием вирусных культур показывают, что, хотя пациенты могут оставаться носителями SARS-CoV-2 в течение нескольких недель после появления симптомов, живой вирус нельзя культивировать из образцов, собранных позднее, чем через 9 дней после появления симптомов. Это позволяет предположить, что средний период контагиозности и риск передачи могут быть ограничены. В период между 2-м и 3-м днями до и 8-м днем после появления симптомов (Peeling et al., 2022) получение истинно положительных результатов полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени является наиболее вероятным. Серологические тесты для выявления иммунного ответа пациента на инфекцию обычно используются не ранее, чем через 7 и более дней после появления клинических симптомов COVID-19.

Таблица 3. Преимущества и недостатки диагностических тестов на инфекцию SARS-CoV-2 у пациентов COVID-19 (Peeling et al., 2022, с модификациями)

Тип теста	Цель	Преимущества	Недостатки
Первые 2 нед после появления симптомов
Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в реальном времени (назофарингеальные или назальные пробы)	Детекция РНК вируса	Наиболее чувствительный и специфичный метод	Относительная дороговизна; для выполнения анализа необходимы квалифицированный персонал и дорогостоящее оборудование; получение результатов анализа может занять 24–48 ч
Антигенный тест (назофарингеальные или назальные пробы)	Детекция вирусного белка	Относительная дешевизна; быстрота анализа (15–20 мин); для выполнения анализа не требуются квалифицированный персонал и дорогостоящее оборудование	Низкая чувствительность метода
Более чем 2 нед после появления симптомов
Тест на наличие антител к SARS-CoV-2 в крови пациента	Ретроспективная диагностика инфекции	Получение результата теста в течение 24 ч	Возможны ложно-положительные результаты
Несмотря на клиническую симптоматику, результаты стандартных лабораторных тестов отрицательные
Повторение стандартных лабораторных тестов на биологическом материале из нижних дыхательных путей (мокрота, бронхоальвеолярный лаваж, аспират из трахеи)	Подтверждение клинического диагноза	–	–

Серологические методы диагностики показывают наличие в организме человека специфических антител к вирусу. Антитела класса IgM образуются во время острой фазы инфекции. Антитела класса IgG необходимы для возникновения длительного иммунитета после перенесенной инфекции. Среди серологических методов диагностики COVID-19 чаще всего применяют иммуноферментный анализ [28, 29]. Обнаружение в образце сыворотки крови IgM может свидетельствовать как о текущей инфекции, так и о недавно перенесенной болезни. Обнаружение в образце сыворотки крови IgG свидетельствует о перенесенной инфекции. При анализе сывороток крови 285 пациентов с COVID-19 было показано, что у всех больных на 19-й день после появления симптомов в сыворотке крови присутствовали антитела класса IgG к SARS-CoV-2 (рис. 6). При этом наблюдали все три возможных варианта сероконверсии: одновременное появление антител классов IgG и IgM, более раннее появление антител класса IgG, более раннее появление антител класса IgM.