2.1. Механическое отделение волос
В судебно-медицинской практике исследование волос в основном проводится по морфологическим признакам его структуры: коркового вещества, кутикулы и сердцевины. Наиболее информативным для решения сходства или различия волос человека является корковое вещество, тогда как для животных — сердцевина.
Наиболее часто перед судебно-медицинскими экспертами судебно-следственные органы ставят вопрос о жизнеспособности и механизме отделения. Волосы могут быть отделены разными способами: медленным натяжением, с приложением значительного усилия, одномоментно (рывком); с помощью орудий (остро- и тупорежущими предметами — ножи, ножницы, топоры и др.); тупогранными предметами (камни, доски, колуны и др.). Волосы могут быть отделены огнестрельным оружием (винтовки, пистолеты, автоматы и др.). Каждый из них оставляет след на воспринимающей поверхности, свой характерный отпечаток.
Вырванные, жизнеспособные волосы характеризуются деформированной луковицей в виде крючка, или цилиндра, окруженной гомогенными прозрачными влагалищными оболочками, состоящими из жизнеспособных клеток, в которых просматриваются ядра, по которым можно определить их индивидуальную принадлежность. Если луковица цела, то на ее конце можно видеть вдавление для волосяного сосочка. При насильственном отделении волоса клетки внутреннего корневого влагалища заворачиваются вдоль стержня волоса в виде «вуальки» и придают корню волоса самую разнообразную форму. В такой луковице всегда присутствуют меланофоры черного цвета, ответственные за продукцию пигмента и цветность волос. Если же часть корня остается в коже, то оборванная часть луковицы, лишена оболочек. Тогда свободные концы клеток кутикулы волоса завернуты книзу и смяты. Дефекты в виде «плешинки» свидетельствуют о насильственном его отделении, жизнеспособности волоса. При длительном неблагоприятном внешнем воздействии на вырванный волос клетки влагалищного эпителия уничтожаются, и волос приобретает веретенообразную форму, длина которой намного превышает ширину.
Луковица жизнеспособного волоса богата клеточными элементами, ядра которых содержат ДНК и РНК, по которым можно определить индивидуальную принадлежность волос и давность отделения. Луковица выпавшего волоса (фаза телогена) имеет колбовидную форму, без влагалищных оболочек. Пигмент содержится в незначительном количестве, видны пустоты, заполненные воздухом. Края луковицы ровные или бахромчатые. Конец луковицы закруглен, не имеет вдавления, в которое входит сосочек у жизнеспособных волос. Такие волосы выпадают самостоятельно или при расчесывании.
У отживающего волоса (фаза катагена), извлеченного с применением незначительного усилия, луковица несколько вытянутой формы или колбообразная. При отделении такого волоса он как бы вылущивается из волосяной сумки, увлекая остатки внутреннего корневого влагалища, окружающие колбообразную луковицу, в виде едва заметного «венчика». Это отличает ее от луковицы отжившего волоса. Вылущивание происходит в пространстве между кутикулой волоса и внутренним корневым влагалищем. В области шейки луковицы в месте перехода в стержень и на самом стержне можно наблюдать муфту из блестящих, гомогенного вида клеток, представляющих собой эластичные волокна кожи. В этой стадии клетки не синтезируют ДНК, РНК, что свидетельствует об их нежизнеспособности, но информация об элементном составе в нем остается.
Волосы жизнеспособные, вырванные имеют деформированную луковицу в виде крючка, богатую пигментом. При длительной эксплуатации, например, в составе шиньона они подвергаются значительным повреждениям. На месте перехода луковичной части в стержень на волосах образуется сгиб с грубыми, продольными трещинами. Такой комплекс признаков свидетельствует о значительных механических воздействиях на волосы после их насильственного отделения. Влагалищные оболочки в процессе эксплуатации уничтожаются, а на месте сгиба (вероятно, особенность изготовления шиньона или эксплуатации) волоса возникают трещины.
Рис. 2.1. Луковицы нормальных волос: а — выпавшего, фаза телогена;
б — отживающего, фаза катагена (волос седой); в — вырванного, фаза анагена
Для установления жизнеспособности луковицы применяются гистохимические методы, основанные на обнаружении РНК цитоплазмы, а также ДНК в ядрах. Самым доступным методом для выявления ДНК является метод Фельгена–Розенберга, для РНК — метод Браше, или окраска галлоцианин-хромовыми квасцами. Исследования проводят на поперечных срезах, не удаляя целлоидин, ибо закрашивание последнего не является помехой.
Активная РНК при окраске методом Браше имеет розово-лиловую зернистую структуру и ярко-синее ядро. С потерей РНК в клетке исчезает зернистость, происходит ороговение клеток. В местах перехода луковицы в стержень, где идет процесс ороговения, ядро окрашивается в бледно-голубой цвет, так как исчезает РНК. У отживающих волос зернистость РНК не наблюдается, цитоплазма бледно-розового цвета, ядро — бледно-голубого. В отживших волосах РНК отсутствует, и краска не воспринимается клеткой.
При использовании галлоцианин-хромовых квасцов хроматин ядер и РНК цитоплазмы, в частности зернистость Ниссле, окрашиваются в темно-синий, почти черный или серовато-синий цвет. Цитоплазма сероватая, все остальное остается почти бесцветным.
ДНК локализована исключительно в ядрах клеток и обнаруживается только в жизнеспособных волосах. О состоянии ее судят по интенсивности окраски ядра, по количеству и величине определяемых в нем структур. При резких нарушениях ядро может быть раздутым, в виде пузыря. Она выявляется в виде гранул лилового цвета с красно-пурпурным или красно-фиолетовым оттенком на фоне нежно-розовой окраски ядра. Интенсивность окраски меняется к корню волос. Выявляется ДНК в течение 12–14 дней после отделения, в лобковых волосах — до 20 дней. Уже через 5–6 дней после отделения волоса его количество резко уменьшается. РНК определяется примерно до 1 мес после отделения. Для контрольных исследований один из срезов не подвергают гидролизу, препарат при этом не должен окраситься.