Глава 11. Методология химико-токсикологического и судебно-химического анализа
Ключевые моменты
- Особенности ХТА при острых отравлениях.
- Особенности СХА трупного материала.
- Отбор проб для анализа.
- Предварительные испытания подлинности.
- Подготовка пробы для анализа — изолирование (выделение), очистка и концентрирование ксенобиотика.
ХТА — количественное определение ядовитых и сильнодействующих веществ и их метаболитов в биологических материалах живых лиц, а также анализ вещественных доказательств с места отравления.
В СХА исследованию подвергаются трупный материал, вещественные доказательства с места происшествия, а также биологические жидкости и ткани человека при необходимости судебного расследования.
Полученные результаты являются основой для постановки диагноза и последующего лечения (ХТА) или для составления судебно-медицинского заключения (СХА).
При анализе проводят определение ксенобиотиков разных хими-ческих классов. Чаще всего приходится сталкиваться с определением алкоголя и его суррогатов (алифатических спиртов и их эфиров, хлорированных, ароматических углеводородов, тормозных жидкостей с этиленгликолем), алкалоидов, cнотворных и психотропных лекарствен-ных средств, фармакопейных настоек, фосфорорганических инсектицидов и прижигающих жидкостей (концентрированных растворов кислот и щелочей).
Особенности химико-токсикологического анализа при отравлениях
Главное требование к ХТА — быстрое получение достоверных результатов. Для этого должна быть налажена круглосуточная работа в химико-токсикологической лаборатории, а ее расположение должно обеспечивать незамедлительную доставку проб с места происшествия.
Объектами ХТА являются кровь, моча, рвотные массы, промывные воды желудка, а также вещественные доказательства: лекарственные препараты, растительные объекты (например, маковая соломка), органические растворители, средства бытовой химии, остатки пищи, неизвестные жидкости и др., обнаруженные на месте отравления.
Для определения токсикантов в биоматериалах требуются специальные методики изолирования (выделения) и высокочувствительные экспресс-методики анализа. Современные методы ХТА являются основой безошибочной диагностики отравления и позволяют контролировать выведение токсичных веществ из организма в процессе детоксикации, т.е. при мониторинге лечения.
Надежность результатов ХТА зависит от токсико-кинетических параметров ксенобиотика и, следовательно, от времени, прошедшего с момента отравления до забора (отбора) биологической пробы. Кроме того, при проведении ХТА следует принимать во внимание характер отравления (острое или хроническое), количество принятого яда и массу тела (дозу на единицу массы), биодоступность токсиканта и его связывание с белками, синергизм или антагонизм действия с другими химическими веществами, пол пострадавшего и состояние его здоровья (наличие сопутствующих заболеваний).
Пренебрежение любым из перечисленных факторов может стать причиной ошибки и привести к ложноотрицательному или ложноположительному результату. Ложноотрицательный результат может быть получен при малом содержании токсиканта в биологической пробе, неправильном ее хранении, отсутствии токсико-кинетических характеристик, умышленном разбавлении пробы или ее подмене. Ложноположительный результат анализа может быть получен при определении в биопробе лекарственных средств, применяемых пострадавшим перед отравлением, но не послуживших причиной отравления. Ложный аналитический сигнал при этом получают для соединений, близких по химической структуре к ксенобиотику, вызвавшему отравление. Как правило, достоверность отрицательных заключений составляет около 70%, а положительных — 90%. Например, в одной из городских наркологических больниц при определении опиатов (методами ГХ/МС и поляризационного флуороиммуноанализа — ПФИА) в 710 образцах мочи пациентов, страдающих наркотической зависимостью, из 437 положительных анализов 7 оказались ложноположительными (1,6%), а из 273 отрицательных — ошибочными 13 (4,8%). Таким образом, достоверность положительных заключений значительно выше, чем отрицательных.
В химико-токсикологической лаборатории в обязательном порядке ведется учет выполненных анализов. Сведения по каждой анализируемой пробе фиксируются в журнале в соответствии с существующими требованиями. Обязательно указывают название отделения/лаборатории, дату, номер анализа, фамилию и инициалы пострадавшего, номер истории болезни, диагноз (предварительный и окончательный). Фиксируются объект исследования (кровь, моча, волосы), время отбора и доставки биологической пробы, выбранный метод исследования и результат проведенного анализа. Регистрацию завершает подпись специалиста клинической лаборатории, выполнявшего анализ.
Всю процедуру ХТА принято делить на 2 основных этапа. При остром отравлении на догоспитальном этапе бригада скорой помощи проводит сбор вещественных доказательств отравления (остатков лекарственных препаратов: порошков, таблеток, ампул, подозрительных жидкостей, остатков пищи). Для транспортировки вещественные доказательства помещают в чистые емкости и тщательно закупоривают. Вскрывать упаковку с поступившими для ХТА объектами имеет право только эксперт, которому поручено производство экспертизы.
При отравлении неизвестным ядом у живых лиц берут пробы мочи и промывных вод желудка (первая порция — 200 мл). На этикетке закупоренной емкости с биоматериалом указывают дату отбора пробы, фамилию, имя, отчество пострадавшего, номер истории болезни.
Кровь в количестве 10 мл отбирают в чистый сухой флакон, содержащий 2–4 капли антикоагулянта (гепарина, цитрата натрия). Флакон закрывают пробкой, содержимое флакона перемешивают, пробу маркируют.