Глава 7
Основы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции
Е.В. Буравцова
Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции основана на выявлении маркеров ВИЧ (антител, вирусных антигенов, РНК ВИЧ и провирус-
ной ДНК ВИЧ).
Методы определения антител и антигенов ВИЧ обладают высокой чувствительностью и позволяют своевременно выявлять большинство инфицированных (эпидемиологическая чувствительность), однако эти методы отличаются по своей способности выявлять низкие концентрации антител/антигенов (аналитическая чувствительность метода), например в период до полной сероконверсии.
Стандартным методом диагностики ВИЧ-инфекции служит определение антител/антигенов к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) и иммунохемилюминесцентного анализа (ИХЛА). В диагностических лабораториях для проведения этих исследований должны использоваться сертифицированные в установленном порядке коммерческие наборы.
ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ
Методы ИФА основаны на простой методологии, обладают высокой чувствительностью и пригодны для исследования большого числа образцов.
Общее свойство всех вариантов ИФА - использование ферментных конъюгатов, связанных со специфическим антителом или антигеном ВИЧ, и субстрата/хромогена, дающего окраску в реакции, катализируемой связанным ферментным конъюгатом. Комбинированные ИФА-тесты нового поколения одновременно выявляют как антитела, так и антигены ВИЧ.
Эти тесты демонстрируют высокую аналитическую чувствительность, которая связана с использованием комбинации метода III поколения («сэндвича») для выявления антител и одновременного выявления р24 антигена ВИЧ.
ИММУНОХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ АНАЛИЗ
ИХЛА - современный метод лабораторной диагностики. В ИХЛА используется иммунологическая реакция, где в качестве субстрата присоединяются люминофоры - вещества, светящиеся в ультрафиолете. Уровень свечения измеряется на специальных приборах - лю-минометрах. Метод схож с ИФА, но обладает большей специфичностью и чувствительностью, а также его проведение занимает меньше времени.