Цели модуля
• Знать: методы культивирования, индикации и идентификации вирусов.
• Уметь: проводить заражение куриного эмбриона вируссодержащим материалом, ставить реакцию вирусной гемагглютинации и реакцию торможения гемагглютинации.
• Владеть: методами оценки результатов действия вирусов на биологические объекты.
5.1. МЕТОДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ
Вирусы - облигатные внутриклеточные паразиты, не способные размножаться на искусственных питательных средах, поэтому для культивирования вирусов используют биологические модели:
• чувствительных лабораторных животных;
• куриные эмбрионы;
• культуры клеток (тканей).
Лабораторных животных в настоящее время применяют для культивирования вирусов, не размножающихся в культурах клеток и куриных эмбрионах. Для культивирования в зависимости от тропизма вирусов используют мышей, кроликов, хомячков, а также, если культивирование вирусов затруднено, возможно заражение приматов. Чаще используют молодых животных, а также новорожденных как наиболее восприимчивых. Вируссодержащий материал обычно вводят интрацеребрально, интраназально, per os и другими способами. При этом иногда можно воспроизвести модель инфекционного процесса, наблюдать некоторые клинические симптомы.
В куриных эмбрионах способно культивироваться большое количество разнообразных вирусов. Строение куриного эмбриона показано на рисунке. 5.1. Вируссодержащий материал вносят на хорион-аллантоисную оболочку, в аллантоисную или амниотическую полость, в желточный мешок 10-12-дневного оплодотворенного эмбриона. Заражение можно проводить открытым и закрытым способами в строго стерильных условиях (в специальном боксе, стерильными инструментами, с соблюдением правил асептики).
Рис. 5.1. Строение куриного эмбриона и способы его заражения: 1 - заражение в полость амниона; 2 - в аллантоисную полость; 3 - в желточный мешок