4.1. РАЗВИТИЕ ТЕХНОЛОГИЙ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА ЛИМФОЦИТОВ
Определение содержания основных популяций лимфоцитов началось в 60-х годах XX века, когда было установлено, что лимфоциты, несмотря на свое морфологическое единообразие, состоят из двухклеточных популяций - Т- и В-клеток. Предшественники этих клеток образуются в костном мозгу из единой стволовой кроветворной клетки. Предшественники Т-клеток мигрируют в тимус и дифференцируются в зрелые Т-клетки. Предшественники В-клеток дифференцируются в зрелые клетки в костном мозгу. Более 60% лимфоцитов периферической крови и около 90% лимфы составляют Т-лимфоциты, что связано с их повышенной рециркуляцией в организме. Характерной особенностью Т-клеток является наличие на их мембране рецепторов для эритроцитов барана (CD2). В отличие от Т-, В-клетки обладают слабой способностью к циркуляции. В связи с этим В-клетки практически отсутствуют в лимфе, а в крови их количество составляет не более 20%. Характерной особенностью В-лимфоцитов является наличие на их поверхности иммуноглобулиновых рецепторов и рецепторов к третьему компоненту комплемента
(CR3).
На основе указанных характеристик в 70-80-е годы ХХ столетия проводилась идентификация и подсчет количества Т- и В-лимфоцитов. Достаточно простым методом определения содержания в периферической крови Т- и В-клеток был метод розеткообразования. При смешивании с эритроцитами барана Т-клетки образуются фигуры, получившие название розеток. Количество таких розеток примерно соответствует количеству Т-клеток. Недостатком метода является наличие у части естественных киллеров рецепторов для эритроцитов барана.
В-клетки выявляли по способности рецептора CR3 образовывать розетки с эритроцитами быка, обработанными антиэритроцитарными антителами в субагглютинирующей концентрации и комплементом. Количественное определение числа розеткообразующих Т- и В-клеток проводили методом световой микроскопии.