Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование проводят с целью определения молекулярно-генетического подтипа рака молочной железы и уточнения тактики медикаментозного лечения (табл. 1). При метастатической опухоли для назначения лечениянеобходимо исследовать ИГХ-статус метастазов.
Таблица 1. Молекулярно-генетические подтипы рака молочной железы
| Биологический подтип (по оценке мульти-генной экспрессии) | ИГХ-характеристики |
| Люминальный А | ER – позитивный HER2/neu– негативный Ki67 – низкий (<20%) [Cheang, 2009] PgR – высокий (≥ 20%) [Prat, 2013] |
| Люминальный В | Люминальный В HER2-негативный ER – позитивный HER2/neu– негативный Ki67 – высокий (≥20%) PgR –низкий (<20%) |
| Люминальный В HER2-позитивный ER – позитивный HER2/neu– гиперэкспрессия или амплификация Ki67 – любой PgR –любой |
| HER2-позитивный | ER – негативный HER2/neu– гиперэкспрессия или амплификация Ki67 – любой PgR – негативный |
| Тройной негативный | Тройной негативный небазальный ER – негативный HER2/neu– негативный Ki67 – любой PgR – негативный CK 5/6 - негативный |
| Тройной негативный базальный ER – негативный HER2/neu– негативный Ki67 – любой PgR – негативный CK 5/6 - позитивный |
Исследование проводится на биопсийном и операционном материале. Количество фрагментов биопсии должно соответствовать размеру опухоли в связи с наличием гетерогенности рака молочной железы. На операционном материале ИГХ-исследование рекомендуется проводить в нескольких блоках опухоли для учета гетерогенности опухоли, при этом возможно применение мультиблоков. В диагнозе необходимо отображать наиболее агрессивный подтип, вне зависимости от того, какую долю он составляет от общего объема опухоли.
В связи со значительным влиянием условий преаналитического этапа на результаты ИГХ-исследования требуется постоянный контроль за их соблюдением. Современные стандарты диагностики требуют использовать только 10% нейтральный забуференный формалин. Объем фиксатора должен превышать объем образца не менее чем в 10 раз. Время фиксации для биопсийного образца - от 6 до 8 часов (допустимо до 12 час.), для операционного - от 18 до 72 часов. Декальцинацию необходимо проводить с помощью щадящих методов без использования сильных кислот в связи с разрушением антигенных детерминант в кислой среде.
Необходимыми маркерами для исследования являются HER2, ER, PR, Ki-67. Для подтверждения базального подтипа целесообразно расширить панель с применением маркеров: EGFR, цитокератин 5/6, цитокератин 14. Возможно направление материала пациента на генетическое исследование на наличие мутации BRCA (необходимость такого исследования определяется с учетом анамнеза).